【AbMole科研快报】建立模型以评估表达多细胞角蛋白19的细胞在多能基质细胞诱导的胰岛再生过程中的作用-自主发布-资讯-生物在线

【AbMole科研快报】建立模型以评估表达多细胞角蛋白19的细胞在多能基质细胞诱导的胰岛再生过程中的作用

作者:AbMole中国 2020-11-26T16:16 (访问量:1490)

AbMole精研抑制剂十年,最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是:多细胞角蛋白19的细胞在多能基质细胞诱导的胰岛再生过程中的作用评估模型。

以前,人骨髓源性多能基质细胞(hMSC)中Wnt信号的药理活化产生了条件培养基(CM),该培养基促进了链脲佐菌素处理的小鼠中β细胞的再生。导管损伤的内分泌祖细胞已被证明可在胰腺损伤后产生β细胞,是“信号接收细胞”的候选者。通过纯化活的Dolichos Biflorus凝集素凝集素+细胞并在添加了未经处理,受Wnt激活或受Wnt抑制的CM的基本培养基中培养而获得的来自胰腺小鼠的导管(CK19 +)细胞显示,在48小时后,EdU + / CK19 +细胞的比例显着增加补充,但没有内分泌表型获得。用他莫昔芬(单剂量)治疗的谱系追踪CK19-CreERT; Ai9(RCL-tdT)小鼠表现出胰腺CK19 +细胞的特异性标记。链脲佐菌素治疗(60 mg / kg /天,5天)导致β细胞质量,胰岛密度和胰岛素+细胞频率降低,以及葡萄糖耐量降低和胰腺白细胞浸润增加。该模型将在以后的研究中用于在hMSC CM诱导的胰岛再生过程中沿袭追踪CK19 +细胞的贡献。

GSK-3α和GSK-3β抑制剂CHIR-99021(Abmole, M1692,纯度>99%) ,在本研究中用于验证CHIR99021和IWR-1对hMSC细胞内β-catenin的影响。

Figure 2.4 Treatment of hMSC with CHIR99021 increased intracellular β-catenin.

由于GSK3抑制剂CHIR99021促进了β-catenin破坏复合物的失稳,增加了β-catenin在细胞内的储存,从而影响了与细胞生长,增殖和分化有关的因子的转录。经过24小时处理后,与DMSO对照相比,用10μM,15μM或20μMCHIR99021在不含血清的基础AmniomaxTM培养基中处理的hMSC通过流式细胞术显示细胞内β-catenin的平均荧光强度(MFI)显著增加。

鸣谢:Brianna Ananthan, The University of Western Ontario.

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