AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：mTOR可能与PARP-1相互作用，调节光感受器中可见光诱导的依赖性细胞死亡

过度光照是一种有害的环境因素，在视网膜变性的发病机制中起着至关重要的作用。然而，光致视网膜/感光细胞死亡的机制尚不清楚。雷帕霉素(mTOR)和聚(adp -核糖)聚合酶1(PARP-1)已成为治疗许多神经退行性疾病的主要靶点。本研究的目的是阐明光诱导光感受器细胞死亡的机制，以及mTOR和PARP-1抑制是否具有神经保护作用。

研究中，利用PI/Hoechst染色,shRNA分析,免疫印迹分析,细胞分离,质粒瞬时转染,激光共焦显微镜,小鼠模型,ERG和 H & E染色等实验方法，探索雷帕霉素/ 氨基苯甲酰胺(3AB)起到的神经保护作用，抑制mTOR/PARP-1作用下视网膜光损伤。

研究人员在光损伤的661 W细胞中评估了细胞死亡机制。661 W细胞是一种表现出锥型光感受器细胞和生化特征的永生化光感受器样细胞系。死亡过程主要表现为PARP-1的过度激活和AIF核易位。PARP-1或AIF敲除对光损伤的光感受器起着显著的保护作用。更重要的是，研究人员观察到mTOR和PARP-1信号之间存在串扰，mTOR可能通过中间因子sirtuin 1 (SIRT1)调控依赖性细胞死亡。体内实验也证实了类依赖性细胞死亡，其中PARP-1或mTOR抑制对光诱导损伤提供了显著的神经保护，并在视网膜结构和功能分析中均得到了证实。总之，这些结果阐明了在光损伤的光感受器/视网膜中，mTOR调控的依赖性细胞死亡机制，并可能提供了新的视网膜变性疾病的神经保护疗法。

Rapamycin是一种选择性的mTOR抑制剂，IC50为~0.1 nM。Rapamycin作用于HEK293细胞，抑制内源性mTOR活性，IC50为~0.1 nM,而iRap和AP21967 作用时，IC50分别为~5 nM 和~10 nM。 Rapamycin处理酿酒酵母，诱导细胞周期停在G1/S期，且抑制翻译。 Rapamycin显著抑制T98G和U87-MG细胞活力，这种作用具有剂量依赖性，IC50分别为2 nM和 1 μM, 而对U373-MG细胞没有作用活性，IC50>25 μM。

3-Aminobenzamide(Abmole, M1785，纯度>99%)是一种有效的PARP抑制剂，作用于CHO细胞的IC50为<50 nM，在再灌注期间，是一种因氧化诱导而发生的心肌功能障碍的调节剂。用浓度为0.05 到50 μM的INO-1001处理CHO细胞30分钟，明显抑制PARP 活性， IC50 为50 nM， INO-1001浓度为1 μM 或更高时抑制PARP活性达95%，且没有细胞毒性。此外, INO-1001通过阻断大部分受辐射的DNA片段修复而使CHO 细胞敏感。用400 μM H2O2处理后，通过增强乙酰胆碱诱导的, 依赖内皮细胞层的, NO调节的血管舒张，而提高INO-1001抑制PARP活性。

在研究中，作者研究了小鼠视网膜中，PARP/mTOR抑制剂减弱了光诱导的PARP-1/mTOR信号的激活。小鼠经腹腔注射用20mg/kg 3AB或15mg/kg雷帕霉素照射7000lx光照12 h后。Rapamycin, 3-Aminobenzamide的使用，让相关实验能更好的揭示内在机理。

鸣谢：Pan et al. Cell Communication and Signaling (2020) 18:27