在验证CRISPR或TALEN效率方面,大部分人采用测序的方法,这种方法可以直观的看到是否已成功敲入/敲除基因。但是这种方法耗费较大,因为无法确保送去的测序的单克隆都是成功完成基因敲入/敲除的。鉴于此,部分厂家,如GeneCopoeia,推出了CRISPR及TALEN缺失检测试剂盒,可以快速低成本的筛选出已成功敲入/敲除基因的单克隆。
试剂盒采用错配检测内切酶来检测细胞因NHEJ修复机制而引入的插入缺失。
首先对靶点区域的序列进行扩增,PCR 产物经过解链和退火后会就会形成带有错配的杂合 DNA。接着再利用T7核酸内切酶I识别并剪切带有剪切有错配的杂合双链DNA。后期如果酶切产物跑胶出现两条长度如预期的较短条带,就意味着 CRISPR / TALEN 成功地在基因组靶点上引入了插入缺失突变(如下图)。
试剂盒包含两个组分,具体使用如下:
>>了解更多
你的细胞受到支原体污染了么?
(2015-05-04T08:40 浏览数:5510)
如何让支原体滚远点
(2015-05-04T08:40 浏览数:3825)
CRISPR技术“心”分享
(2015-03-25T09:15 浏览数:5154)
新品:CRISPR / TALEN检测试剂盒
(2015-03-24T16:41 浏览数:4188)
【春季大促】纯化级慢病毒包装服务,八五折促销
(2015-03-06T12:59 浏览数:3617)
qPCR春季大促销,低至1.5元/次,老师再也不用担心我烧钱了
(2015-03-06T12:57 浏览数:4211)
CRISPR & TALEN技术大特惠,Cas9核酸酶、切口酶只需999元
(2015-03-06T12:55 浏览数:3827)
安全位点Safe Harbor基因 试剂盒春季大促销
(2015-03-06T12:53 浏览数:3510)
贺元旦,玩者有礼!
(2014-12-29T09:44 浏览数:3257)
20000+ 人类基因ORF表达克隆,第二天寄送
(2014-10-13T17:08 浏览数:3331)