尚柏生物强势独家推出双荧光素酶报告基因检测技术服务-技术前沿-资讯-生物在线

尚柏生物强势独家推出双荧光素酶报告基因检测技术服务

作者:尚柏生物医学技术(北京)有限公司 2010-05-07T00:00 (访问量:17393)

细胞信号转导研究的利器——双荧光素酶报告基因检测

信号转导检测
细胞信号转导的调节(抑制或增强)
目的蛋白对已知蛋白的调控
启动子/增强子检测
病毒/细胞相互作用
转录因子(IFN  -NF-KB,IRF3)
药物诱导作用或效果
各种射线处理对细胞因子的调控研究


传统检测方法——WB
SCI文章必备数据(IF>3,调节功能研究)。
Western blotting 得到结果所需时间太久.
操作过程繁琐,并且需要使用比较昂贵的抗体.
WB结果缺乏统计学依据。
人为影响因素太大

荧光素酶报告基因的优点
优越的灵敏度,比Westernbloting灵敏度高1000倍以上。
具有可靠的统计学原理,每组实验重复三次。
高信号值,无内源活性。
目前主流检测方法。
检测快,灵敏度高。
我们并不放弃WB检测,在荧光素酶检测后,样品在进行WB检测,使实验更具有说服力。
使用范围广,可检测细胞内任何分子。

荧光素酶报告基因的检测原理
原理:制备含有Luc/Rluc的DNA载体,进行过表达细胞株。

细胞选择:根据实验需要选择细胞株,通常选择转染效率较高的293T,Hela细胞及原代细胞等。

转染:将带有荧光素酶标记的报告基因和目的基因进行过表达 (不同时间点) .

提供刺激:一般为药物处理,病毒感染,紫外照射等各种条件刺激。

蛋白收集:采用进口/国产试剂盒(Promega,invitrigen,尚柏生物)进行收集,实验重复三次。

测量荧光:Modulus™ 单管型多功能荧光计 进行检测。

结果分析


服务内容
1.我们提供IFN-Luc,IFN-Luc,ISRE-Luc,PRDII-Luc,ERSE-Luc,UPRE-Luc,NF-KB-Luc双荧光素标记的报告基因,可对IFN-α, IFN- β, IRF3, NF-KB等通路检测。
2.我们提供常见表达细胞:293T,Hela及常见的原代细胞等。
3.客户只需根据实验需要提供目的基因、荧光素标记的报告基因、表达细胞即可。
4.我们提供真实的原始数据,结果分析报告。

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