黑胶虫清除剂

Nanobacteria Removal Agent

产品描述

“黑胶虫”是一种常见的细胞污染物，与细胞竞争性生长，对细胞生长不利，严重时导致细胞死亡。目前很多细胞存在被“黑胶虫”污染的现象，对细胞培养及其后续实验造成了极大地影响。“黑胶虫”污染的细胞常见的特性有以下几点：

① 培养基不浑浊，在显微镜下观察，细胞周围和培养液中有“小黑点”呈现布朗运动，且随着培养时间的延长“小黑点”逐渐增多；

②“黑胶虫”污染的细胞，营养消耗快，需要频繁更换培养液;

③“黑胶虫”污染的细胞生长缓慢，细胞状态差，空泡化严重，甚至还可能导致细胞形态的改变。黑胶虫清除剂用于清除细胞培养过程中产生的“黑点”，只需1~3天就可以显著抑制“黑点”生长，一周左右即可清除“黑点”。本产品经过细胞库数百种细胞的测试和长期的实验验证，对细胞生长无明显影响，高效、特异性清除“黑胶虫”，最大程度上挽救珍贵细胞。

质量控制

通过细菌、真菌、支原体、内毒素检测。

通过渗透压、pH 检测。

通过产品性能检测。

运输与保存方法

冰袋运输

-20℃避光保存，保质期2年

使用方法

从-20℃冰箱内取出黑胶虫清除剂，将试剂管瞬时离心(3000rpm，3~5s)后放置于EP管架上，用75%的酒精喷洒试剂管的表面，在生物安全柜中进行无菌操作；

以T25细胞培养瓶为例

对于黑胶虫污染的细胞，在细胞培养基中加入适量黑胶虫清除剂，通常推荐使用的稀释倍数为2000×，如：6mL的细胞培养基加入3μL的黑胶虫清除剂混匀。连续加药培养1~2周即可有效清除黑胶虫污染。

若黑胶虫污染较严重，可酌情增加药物浓度以提高清除黑胶虫的效率，推荐尝试最小稀释倍数、中间稀释倍数、最大稀释倍数三个浓度进行测试。以细胞系(成纤维样)为例，建议将细胞分为三份，分别采用500×、1000×、2000×三个浓度进行黑胶虫清除，若500×对细胞生长无明显影响，建议采用500×清除黑胶虫，若500×对细胞生长有明显影响，则采用1000×清除黑胶虫，连续加药培养1~2周即可有效去除黑胶虫污染。

注意：可参考下表选择稀释倍数，达到最佳清除效果。

特别提醒

①使用本试剂前请仔细阅读说明书；

②本产品经0.1μm 过滤除菌，使用本产品时无需过滤，可直接加入培养基使用；

③本试剂具有专利技术，-20℃保存时不冻结，使用时无需解冻，从-20℃取出即可使用；

④为了发挥最好的药效，含药培养基建议现配现用，如果加药培养基未用完，于4℃冰箱中避光保存，2周内用完，使用培养基前需预热至37℃；

⑤贴壁细胞换液或传代前，弃去旧的培养基，用含1000×黑胶虫清除剂的PBS轻轻冲洗细胞表面2次。悬浮细胞、贴壁不牢的细胞、半贴半悬细胞换液或传代前，可利用黑胶虫直径远小于细胞直径的特点，采用150g(或900rpm)低速离心5mins，弃去旧的培养基，再用含1000×黑胶虫清除剂的PBS轻轻冲洗细胞2次；

⑥用含药PBS清洗细胞后，加入含有黑胶虫清除试剂的新鲜完全培养基(传代后铺细胞需更换为新的瓶/板)，1天换液1次， 连续加药4~7天，或者2天换液1次，连续加药7~14天，若黑胶虫污染非常严重时，需增加换液频率和延长处理时间；

⑦细胞老化或状态异常时会产生黑色的细胞分泌物，此种分泌物会随着细胞培养不断产生，并不是“黑胶虫”，无法通过黑胶虫清除剂有效去除;

⑧如遇个别细胞对本试剂敏感，细胞生长速度明显受影响时，建议减量使用或进行稀释度测试；

⑨黑胶虫清除剂处理后，会有很好的清除黑胶虫效果，但是如果环境或使用试剂中仍有污染源存在，细胞可能会再次污染，因此需做好适当的预防措施；

⑩加入本产品进行黑胶虫预防和清除时，无需添加双抗(青霉素-链霉素)；

⑪为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；

⑫本产品仅供研究或进一步生产使用，不得用于诊断或治疗。