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肾缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠模型

肾缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠模型

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产品名称: 肾缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠模型

英文名称: Rat Model for Renal Ischemia-Reperfusion Injury (RIRI)

产品编号: DSI529Ra01

产品价格: 1元

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 来源缺血再灌注,双侧肾动脉夹闭法

模式动物品系:SD大鼠,SPF级,雄性,体重 220g~250g

实验分组:随机分组:对照组,模型组,阳性药物组,受试药物组,15只每组

实验周期:24h or 72h

建模方法:

1. 选取250g左右大鼠,术前禁食12h,自由饮水。

2. 15%水合氯醛(350mgkg)腹腔注射麻醉,大鼠背部去毛,消毒备皮。

3. 在背部脊椎旁1cm、肋骨下缘1cm处剪开皮肤及肌肉,可见到肾脏, 小心分离出两侧肾脏的肾动脉,迅速用动脉夹夹闭两侧肾动脉。

4. 缺血60min后松开动脉夹,恢复血流,观察肾脏恢复情况。

5. 分两层缝合开口,待大鼠清醒后,将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养,定期观察大鼠状态及死亡情况并做好记录。

6. 对照组不做缺血处理,其他操作相同。

7. 分别取再灌注0h3h6h12h24h72h六个时间点取材。麻醉大鼠,下腔静脉取血,室温静置2h后于43000r离心10分钟提取血清,放入-80冰箱冻存。同时取左肾组织留作病理标本,右肾组织分生标本。

应用:疾病模型

模型评价

1. 血清生化指标检测:

取各时间点(0h1h3h6h12h24h72h)血清,检测血清BUN(尿素氮)和Scr(血肌酐)水平,评估肾功能。

2. 肾系数检测

摘取双侧肾脏后,生理盐水冲洗,称重计算肾系数。

肾系数=双侧肾重(mg/体重(g

3. 肾小管坏死的评分

每张切片×200 倍镜下取外髓质部 10 个视野,按 0 = 正常,1 = 轻微损伤(受损肾小管< 5%) 2= 轻度损伤(受损肾小管 5 %25 %) 3 = 中度损伤(受损肾小管 25 %75 %) 4 = 重度损伤(受损肾小管> 75 %) 作半定量分析并计算其均值,作为肾小管坏死的评分指数

 

组织病理学

4%多聚甲醛溶液固定48h。常规组织脱水、透明、浸蜡 、包埋。石蜡切片进行HE染色和PAS染色。

对照组大鼠肾小球、 肾小管及肾间质结构基本正常。在模型组,随着再灌注时间的延长呈现不同程度的肾脏病理改变,可见肾小管上皮细胞浑浊肿胀,出现水样或空泡变性,刷状缘消失,部分肾小管上皮细胞凝固性坏死、脱落,腔内可见管型,并可见间质水肿,间质内灶性炎症细胞浸润,肾小球病变不明显。

 

标志因子水平

ELISA 法检测血清 TNF-α、IL-6 含量, 模型组大鼠血清 TNF- α 和 IL-6 含量在各时间点均显著高于对照组,其中24h为最显著