产品描述

核糖核酸酶A，英文名Ribonuclease A，缩写RNase A，CAS NO：9001-99-4，一种核糖核酸内切酶（endoribonuclease），特异性识别嘧啶类核苷酸3’-核糖磷酸基团，如序列pG-pG-pC-pA-pG经切割产生pG-pG-pCp和A-PG，当切割单链RNA时活性最高，推荐工作浓度为1-100μg/ml，兼容于各种反应体系。低盐浓度（0-100mM NaCl），可切割单链RNA，双链RNA，以及RNA-DNA杂交形成的RNA链。高盐浓度（≥0.3M），RNase A仅特异性切割单链RNA。RNase A不会水解DNA，因DNA缺少形成环形中间体必需的2’-OH。

核糖核酸酶A，英文名Ribonuclease A，缩写RNase A，常常用在质粒DNA或基因组DNA制备过程中去除RNA，此制备过程中DNase酶活性的存在与否是需要重视的污染之一，可采用水浴煮沸这种传统方法来灭活DNase活性。也可以用来去除蛋白样品中的RNA污染。另外，RNase A还可用于RNA序列分析，RNA酶保护分析等实验。

产品特性

1）CAS NO：9001-99-4

2）来源：牛胰腺

3）比活力：≥50 Kunitz units/mg

4）最佳工作pH：7.6（pH 6.0-10.0有活性）

5）最佳工作温度：60℃（15-70℃有活性）

6）激活剂：钠盐、钾盐等

7）抑制剂：核酸酶抑制剂（RNase inhibitor）

8）稳定性：RNase在加热和去污剂条件下都很稳定。RNase A溶液可耐受温度高达100℃。于此高温下，pH 2.0-4.5范围内溶液稳定性最高。

9）溶解性：溶于水（10mg/ml）

保存与运输方法

保存：-20℃干燥冻存，3年稳定。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. 储存液制备

【注意】：此为RNase A储存液配制的常用方法之一，也可以根据实验室传统的方法，或者参考文献资料使用其他方法制备储存液（如直接溶于10mM Tris-HCl, pH 7.4）。

a）取适量RNase A溶解于10mM醋酸钠（pH 5.2），配制成10mg/ml RNase A储存液；

b）100℃加热15min，之后冷却到室温，然后加入1/10体积的1M Tris-HCl（pH 7.4），调其pH至7.4（例如，5ml 10mg/ml的RNase储存液加入500μl 1M Tris-HCl, pH7.4）；

c）分装成单次用量于-20℃冻存，可稳定保存1年。

【注意】：在中性条件下煮沸RNase A溶液，会有RNase沉淀形成；在更低的pH下将其煮沸，如有沉淀可以观察到，可能由于蛋白杂质存在造成。煮沸之后若发现沉淀，可通过高速离心（13,000 rpm）去除杂质，然后分装冻存。

2. 使用浓度

【注意】：本品应用非常广泛，具体的使用方法和工作浓度请根据实验经验或参考文献来调整。

RNase A常用在质粒DNA制备中去除RNA污染，在此应用中，可直接加入DNase-free RNase A储存液，使其终浓度为10μg/ml。