默克分析化学为您解读液相色谱分析法中的“两性”话题

来源: 默克生命科学   2021-1-11   访问量:1114评论(0)

反相液相色谱法(RPLC)是应用广泛的色谱分离技术,它能与各种常规的检测方法结合,解决多种分析应用问题。然而对于以下“两性”分析物,反相液相色谱法(RPLC)无法或很少保留。

  1. 极性化合物
  2. 亲水性化合物

正相液相色谱(NPLC),使用不利环保的非水溶性流动相,如己脘或环己脘来分析这些物质。但是在这种实验条件下,很多极性和亲水化合物往往很难溶解,从而限制了NPLC的应用范围。
近几年,一些带有极性修饰的反相色谱柱出现,在一定程度解决了部分极性化合物的分析难题,但是此类固定相并不能从原理上真正做到对极性化合物的保留。

聪明的科学家们发现,在HILIC色谱柱上,物质的洗脱顺序与RPLC恰恰相反。换句话说,在RPLC柱上很难保留或根本不保留的物质,在通常的实验条件下,在HILIC柱上有较强的保留。因此,对于极性化合物和亲水性化合物,选用亲水作用液相色谱-HILIC成为了大家常用的一种手段。

两性离子固定相的色谱柱参数

默克公司生产几种不同特色的HILIC专利产品,包括ZIC-HILIC、ZIC-pHILIC和ZIC-cHILIC两性离子固定相。
ZIC-HILIC固定相:以硅胶为基质,带有共价键合的永(久性磺酸甜菜碱型两性离子官能团。
ZIC-HILIC有粒径为3.5、5和10μm的填料,装在不同尺寸的柱子中。其中毛细管柱的柱材是有玻璃内衬的不锈钢,分析柱的柱材质是PEEK (polyether ether ketone)和不锈钢,而制备柱则是不锈钢的。
ZIC-pHILIC固定相:聚合物基质,具有相同的磺酸甜菜碱型两性离子官能团,有5μm的聚合物填料。
ZIC-cHILIC:磷酰胆碱型两性离子官能团。

不同两性离子固定相的相关应用:
(下面几个应用中右边的文字提取出来放在峰图的下面)
ZIC-HILIC应用实例有机酸分析

ZIC-cHILIC应用实例核苷酸分析

ZIC-pHILIC应用实例类黄酮分析

异黄酮苷(1)、山(奈酚( 2)和紫杉叶素(3)的分离


使用ZIC-HILIC,您将收获:

  • 色谱柱更耐用,单个样品的分析成本降低
  • 直接分离极性和亲水性化合物
  • 更高的质谱灵敏度和更简单的样品处理



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