ACE2逆袭记，病毒“帮凶”变身抗疫“战士”

血管紧张素转换酶2（ACE2），一种机体内关键的羧肽酶，通过靶向作用于血管紧张素I（Ang I）生成血管紧张素1-9（Ang1-9）、血管紧张素II（Ang II）及血管紧张素1-7（Ang 1-7）等有益的活性肽，保护心血管系统，调节血压以及维持血管内环境稳态。随着2003年非典型性肺炎（SARS）爆发，ACE2另一项重要功能被揭开面纱，作为SARS-CoV表面S蛋白受体（Imai等，2005；Kuba等，2005），能够打开细胞的大门，帮助病毒侵入细胞。近期研究表明，肆虐全球的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）因具有与SARS-CoV结构类似的表面S蛋白，且具备与ACE2更高的亲和力，更易依赖ACE2侵入机体（Walls等，2020；Wan等，2020；Wrapp等，2020）。在正常成人肺中，ACE2主要在肺泡上皮II型细胞中表达，其首先被病毒攻陷，可作为体内的病毒库（Zhao等，2020）。除了肺部，ACE2还能在多种组织中表达，包括心脏、肾脏和血管等多种肺外组织中表达（Crackower等，2002；Danilczyk和Penninger，2006；Ding等，2004；Gu等，2005；Hamming等，2004；Zhang等，2020）。ACE2在这些器官组织中的分布可能解释了在病人体内观察到的多器官功能障碍。这些研究皆在指证ACE2是病毒在体内传播的帮凶。

实验试剂：

APB886Hu01 Active Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)

APX273Ge02 Active Spike Protein (SP)

PAB886Hu01 Polyclonal Antibody to Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)

SAA544Rb19 HRP-Linked Caprine Anti-Rabbit IgG Polyclonal Antibody

实验方法：

用含有0.01% BSA的PBS（pH 7.4）梯度稀释ACE2。将100μL样品移入SP蛋白预包被酶标板中，37℃孵育2小时。弃去孔内液体，用PBST洗涤。除去洗液，加入抗ACE2 pAb孵育1小时，弃去孔内液体，用PBST洗板3次。用辣根过氧化物酶标记的二抗孵育后，弃去孔内液体，用PBST洗板3次。加入底物溶液后，在37℃下孵育15-25分钟。最后，向孔中加入50μL终止液，立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度。ACE2和SP的结合活性如图1所示，这种作用呈剂量依赖性。

实验结果：