对虾白斑综合症病毒（WSSV）核酸检测试剂盒（恒温荧光法）
产品名称： 对虾白斑综合症病毒（WSSV）核酸检测试剂盒（恒温荧光法）
英文名称： WSSV
产品编号： YB031171
产品价格： 0
产品产地： 中国/上海
品牌商标： 钰博生物
更新时间： 2023-08-17T10:29:50
使用范围： null
上海钰博生物科技有限公司
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对虾白斑综合症病毒（WSSV）核酸检测试剂盒（恒温荧光法）
对虾白斑综合症病毒（WSSV）核酸检测试剂盒（一管式恒温荧光法）
◆ 产品说明
动物疫病检测系列基于独特的恒温荧光检测技术，可针对食品、动物组织等样品中病害的特异核酸片
段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于对虾白斑综合症病毒（WSSV）的检测，检出限为 103copies/μl
基因组 DNA。
◆ 产品组成（48 测试）
试剂 含量
A-WSSV-I 22μL× 48 管
B-I 90μL × 1 支
PG-WSSV-I 50μL × 1 支
◆ 适用仪器
Dhelix-C、ESE Tube Scanner、Genie II、Deaou-308C 等恒温荧光检测仪，ABI 7500，LightCycler480，CFX 96 等
荧光 PCR 仪。
◆ 自备耗材和仪器
①灭菌 1.5mL 或 2.0mL 离心管；②冰盒；③移液器（0.1-2.5μL，0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭
菌吸头；④离心机；⑤涡旋混匀器；⑥金属浴
◆ 注意事项
1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
1）第一区：样本制备区。
2）第二区：模板添加区。
3）第三区：扩增及产物分析区。
★分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。
2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30
秒。
5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。
◆ 样品处理
①样品的采集和制备是对虾白斑综合症病毒检测的重要步骤，为防止交叉污染，应使用一次性消耗品，研钵应
经 160℃干烤 2 h，其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用 1%次**钠溶液浸泡。②优先采集有症状的或活力差的
个体。对于成虾取鳃或上皮、肝胰腺、肠、胃、游泳足或步足等病灶部位，活力差的个体采集 10-20 尾/池，活力好
的个体至少多点采集 150 尾/池后混匀再随机抽检 10-20 尾。对于幼虾、仔虾、幼体或受精卵取整体，活力差的个体
至少采集 20 尾/池，活力好的虾苗至少采集 150 尾/池。同一批样品，建议多点采集合并后，作为一份样品进行均质，
提取 DNA。③采样过程应快速完成，将采取的样品放入无菌均质袋中均质成糜状，充分混匀。更多样品前处理的注
意事项可咨询我司技术支持人员。
请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月
SM-031171MⅢ-B02
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◆ 实验操作
1. 模板制备（样本制备区）
建议使用配套水生动物病害基因组 DNA/RNA 提取试剂盒系列产品，具体过程详见产品说明书。
2．添加模板（模板添加区，放置于冰盒中进行）
取出所需测试数的已含有反应液 A-WSSV-I 的 PCR 管，将试剂完全解冻，离心 30 秒，在管盖上标记管名（阴
性对照管 NG、样品 XX、阳性对照管 PG）。打开管盖向各管管底分别加入 1μL B-I，盖上阴性对照管管盖，其他各
管分别沿管壁加入 2μL 模板，顺序为待测样品模板、PG-WSSV-I，依次盖好各管管盖，离心 30 秒，立即进行扩增
反应。
3. 扩增反应（扩增及产物分析区）
①恒温仪器 63℃条件下反应 45 min。待仪器升温至 63℃后，新建程序，设置实验名称及反应时间，将步骤 2 中
离心后的 PCR 反应管放入恒温荧光分子检测仪，点击开始检测。
②若使用荧光定量 PCR 仪，则荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 None，将 63℃ 15 s，63℃ 45 s 作为一个
循环，于 63℃ 45 s 处收集荧光信号，45 个循环。
其他仪器请参照仪器说明书进行设置。
◆ 结果判定
①仪器自动判定结果，若显示“阳性”，则样品中含有对虾白斑综合症病毒（WSSV）；若显示“阴性”，且没有出
现 S 型扩增曲线，则样品中不含有对虾白斑综合症病毒（WSSV）或含量低于检测限。
②在荧光定量 PCR 仪上，根据有无“S”型扩增曲线判定结果。若有“S”型扩增曲线，则样品中含有对虾白斑综合
症病毒（WSSV）；若无“S”型扩增曲线，则样品中不含有对虾白斑综合症病毒（WSSV）或含量低于检测限。
★ NG 反应管结果显示“阴性”，PG 反应管结果显示“阳性”，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果
仍为无效，请与技术支持人员联系。