豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒-常用生化试剂-试剂-生物在线
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豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒

豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒

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产品名称: 豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒

英文名称: Guinea pig Tumor necrosis factor α, TNF-α Elisa Kit

产品编号: bk-90010

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产品产地: 国产/进口

品牌商标: 上海帛科

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豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒的优势
1、业的elisa试剂盒生产企业(Elisa检测试剂盒厂家)
2、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
3、规范包被操作----吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
4、的优化方案----重复性高,可靠性强
5、购买本公司的ELISA试剂盒,免费代检测,北京地区免费上门取样
6、技术服务要求:业,规范,高效
7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒样本处理及要求:
 
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
 
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
 
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到
 
100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
 
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后份待检测,其余冷冻备用。
 
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
 
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒操作步骤
 
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
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