动物品种

BALB/c小鼠

动物性别

雄性

动物周龄

6周龄

造模方法

OVA+氢氧化铝凝胶致敏、OVA滴鼻激发

以每只小鼠20ugOVA加氢氧化铝凝胶至300uL的剂量（或20ug OVA、75uL CFA加PBS至200uL）配制混合液，振荡器上振荡两分钟，形成混悬液。小鼠适应性饲养1周后，用注射器分别于小鼠腹部皮下、左右背部皮下各注射100uL新配置的混悬液（每只共300uL），注射时间为第1、8、15天。于第22天开始，气管滴注给药使小鼠吸入5% OVA溶液，缓慢给药，连续激发7天。

成模鉴定

1.  一般观察 哮喘模型组小鼠在激发开始后出现打喷嚏、点头呼吸、呼吸急促、哮鸣音、腹肌收缩烦躁等典型哮喘发作症状，并且后期观察中发现饮食减少、毛色无光泽、行动迟缓及体重逐渐下降。

2.  支气管肺泡灌洗液(BALF)的收集最后1次激发24h后(第28天)将各组小鼠颈椎脱臼处死，无菌条件下分离气管，结扎左主支气管后，剪开右主支气管插入气管导管并固定，无菌生理盐水灌洗3次。1mL/次，收集的BALF于4℃，1200R/min离心5min，弃去上清液，PBS重悬细胞沉淀并涂片进行细胞分类，BALF中白细胞总数及EOS（嗜酸性粒细胞）计数。

3.  ELISA检测血清中（可增加检测BALF上清液）IgE、OVA特异性IgE、IL-4和IL-5的含量；

4.  组织病理学：取左肺组织用4%多聚甲醛固定、脱水、石蜡包埋，4μm切片，HE染色。正常组支气管无明显炎症细胞浸润，结构正常。哮喘组可见弥漫性细小支气管和血管周围炎性细胞浸润，其中嗜酸细胞显著增多。气道上皮有不同程度脱落，支气管豁膜上皮杯状细胞增生，管腔内可见豁液栓及炎性渗出，支气管平滑肌显著增厚，血管周围水肿。

造模周期

35天

后续检测指标建议

呼吸系统疾病模型中基本都会收集支气管肺泡灌洗液，进行细胞分类与计数，可以增加检测BALF上清液中的细胞因子含量

备注