selleck产品在文献中的引用:
Mol Cell Endocrinol,2013, 372(1-2):86
客户使用selleck产品的实验数据:
 更多详情请访问中国唯一官方网站www.selleck.cn/products/PIK-93.html  
生物活性
产品描述
PIK-93是第一个有效的，人工合成的PI4K(PI4KIIIβ)抑制剂，IC50为19 nM；抑制PI3Kα，IC50为39 nM。
靶点
PI3Kα
PI3Kβ
PI3Kδ
PI3Kγ
PI4KIIIβ
 
IC50
39 nM
0.59 μM
0.12 μM
16 nM
19 nM [1]
 
体外研究
PIK-93有效抑制PI3Kγ和PI4KIIIβ, IC50分别为16 nM 和19 nM。PIK-93也抑制其他PI3Ks成员, 包括PI3Kα,β, 和δ, IC50分别为39 nM, 0.59 μM,和0.12 μM。而PIK-93对其他激酶几乎没有抑制效果，即使浓度为10 μM。[1] 0.5 μM-1 μM PIK-93作用于分化的HL60(dHL60)细胞,损害用f-Met-Leu-Phe (fMLP)处理而形成的聚集的稳定性。PIK-93改变全部F-actin fMLP依赖的累积定位，而不改变量。[2] 250 nM PIK-93作用于COS-7 细胞, 有效废除高尔基体中CERT-PH域和FL-Cer的累积。相同浓度PIK-93也显著抑制[3H]丝氨酸标记的内源性神经酰胺转变为神经鞘磷脂。这些说明了PI4KIIIβ在内质网和高尔基体中的神经酰胺转移时具有重要作用，以及有效调节鞘磷脂的合成。[3] 300 nM PIK-93作用于T6.11细胞,降低Carbachol诱导的TRPC6移位到质膜上和Ca2+进入。[4] 最新报道显示PIK-93具有抗肠道病毒功能, 抑制脊髓灰质炎病毒(PV)和丙型肝炎病毒(HCV) 复制, EC50分别为0.14 µM和1.9 µM。[5]
体内研究
 
特征
PIK-93是新型有效的PI3Kγ和PI4KIIIβ抑制剂。
推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)
激酶实验: [1]
PI3Ks实验
使用标准TLC实验测定脂质激酶活性，而测定IC50值。通过准备含激酶的反应混合物, PIK-93(DMSO终浓度为2%), buffer(25 mM HEPES, pH 7.4, 10 mM MgCl2), 和新鲜超声提取的磷脂酰环己六醇 (100 µg/ml)而进行激酶反应。加入含10 µCi γ-32 P-ATP 的ATP开始反应，终浓度为10或 100 µM, 在室温下反应20分钟。用于TLC分析, 加入105 µL 1N HCl，随后加入160 µL CHCl3:MeOH (1:1)而终止反应。对混合的双相进行涡旋，短暂离心，转移有机相到新试管中，使用用CHCl3预包被的凝胶点样吸头。在 TLC板对抽提物进行染色，在 65:35正丙醇:1M 乙酸溶液中进行3到4小时。然后烘干TLC板，用感光成像显示屏进行处理，然后量化。通常在PIK-93 浓度为10-12时测定激酶活性，代表从最高浓度100 µM稀释两倍。
细胞试验: [2]
细胞系
分化的HL60 (dHL60)细胞
浓度
0.5 μM-1 μM
处理时间
40分钟
方法
为了进行肌动蛋白染色, dHL60细胞在悬浮液中和 PIK-93 预温育40分钟，然后在J6-B 离心机中在2000 rpm转速下室温离心5分钟,然后再悬浮在含相同浓度各种试剂的mHBSS中，使其粘附在纤连蛋白覆盖的盖玻片上，然后用浓度为100 nM的 f-Met-Leu-Phe(fMLP)进行刺激处理3分钟。细胞在3.7% PFA 中混合，用罗丹明-鬼笔环肽染色15分钟。
参考文献
[1] Knight ZA, Cell, 2006, 125(4), 733-747.
[2] VanKeymeulen A, et al. Cell Biol. 2006, 174(3), 437-445.
[3] Tóth B, et al. J BiolChem, 2006, 281(47), 36369-3637
[4] Monet M, et al. J BiolChem, 2012, Epub ahead of print.
[5] Arita M, et al. J Virol, 2011, 85(5), 2364-2372.