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百恩维生物科技有限公司
分子生物学技术服务

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产品名称： 分子生物学技术服务

英文名称： Molecular Biology Services

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百恩维生物科技有限公司
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我们的分子生物学技术平台主要包括基因调控元件的克隆，基因修饰，基因报告系统、基因表达系统和转基因载体的构建。
基于分子生物学技术平台，我们提供的技术服务包括DNA片段的克隆，包括基因调控元件、SiRNA基因干扰片段、miRNA基因表达、基因表达、基因打靶等质粒载体的构建；表达系统包括E.coli、昆虫及哺乳细胞表达系统。

1. RNA干扰

       1) RNAi表达质粒构建 
       百恩维生物采用U6或H1启动子的shRNA表达载体，可以在细胞内直接转录出shRNA，行使其RNAi功能，GFP可以监测其转染效率，抗性基因可以用于药物压力下稳定细胞株的筛选，能够解决化学合成siRNA干扰时间短的缺点。同时提供用于RNA干扰实验的腺病毒载体 (Adenoviral vector)、腺相关病毒（AAV Vector)和慢病毒载体(Lentiviral vector)病毒型载体构建服务。我们根据客户提供的基因ID设计3到4个shRNA靶点并合成引物，构建到RNAi表达载体，测序验证正确的shRNA干扰载体，进行高纯度质粒抽提，shRNA干扰载体后续可以直接进行细胞转染实验，病毒包装实验和稳定细胞株筛选实验等。 
        2) microRNA质粒构建 
       百恩维生物采用CMV启动子miRNA表达载体，可以在细胞内直接转录出miRNA，行使其功能,提供pri-miRNA表达载体（pri-miRNA expression vector)、pre-miRNA表达载体(pre-miRNA expression vector)构建服务；同时还提供腺病毒载体 (Adenoviral vector)、腺相关病毒载体(AAV vector）和慢病毒载体(Lentiviral vector)病毒型载体miRNA构建服务, miRNA表达载体后续可以直接进行细胞转染实验，病毒包装实验和稳定细胞株筛选实验等。

2. 基因克隆与亚克隆 

       由客户提供基因ID或者基因序列，为客户从cDNA或者基因组DNA中钓取目的基因，并克隆至指定载体上。由于材料的个体差异及PCR过程中会产生突变等原因，我们不保证获取的基因与参考序列的碱基完全一致。在基因的亚克隆服务中，我们可以将目的基因或某功能元件片段亚克隆转移至客户载体或者百恩维提供的表达载体上。

3. 定点突变服务 

       在很多情况下，您获得的基因序列可能并不是您需要的最终序列，或许在某些地方有部分碱基不符合您的实验要求。比如有部分多余的碱基，或者丢失了部分碱基，或者个别碱基有突变，这些我们姑且都认为它是基因突变。那么要得到最终符合要求的序列，便需要对其进行修改。我们总称为基因突变技术服务。

4. 质粒提取服务 

        对客户提供的质粒进行转化，挑选长势良好的克隆接种进行高纯度质粒抽提。抽提的质粒能够满足分子克隆、细胞转染等实验要求。

5. Western Blot 
      
Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如PVDF膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术广泛应用于检测蛋白水平的表达。
 
客户须知： 

       1、调取基因所需的原材料如由客户提供，客户应保证所提供原材料即基因模板的正确性。如基因模板本身具有移码突变或其它无义碱基突变，由此造成的实验时间延误、重复实验费用或其它经济损失均由客户承担。（从客户提供的基因模板调取基因，如重复两次，均在相同位置出现相同突变，则认为是模板问题。） 
       2、如目的基因所在的载体由客户提供，则客户需要提供足量高纯度的质粒（>5ug，电泳图清晰，达酶切测序要求）及本公司鉴定工作所需的材料。 
       3、本公司在收到客户提供的材料后会在第二个工作日起开始鉴定工作，鉴定的时间不包括在实验周期内。 
       4、客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。 

       服务承诺： 

      1、调取的基因或功能元件片段无移码突变（原材料由客户提供的不在此例），无义碱基突变控制在1%以内。 
      2、完整的实验报告、测序报告。