miRNA靶基因的搜寻是其功能研究的关键环节,对于研究论文的深度与完整性尤为重要。完成谱系与功能鉴定的研究者往往在此处徘徊:大量免费的靶基因在线预测工具不知从何下手?
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特定转录因子与已知启动子区域的结合(Direct ChIP);在已知启动子的大片段范围内寻找特定转录因子的结合位点(ChIP-Scaning);在基因组范围内搜寻特定转录因子;结合的所有启动子片断。
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原位杂交是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基配对规则与细胞内待测的核酸复性结合,并通过探针上所标记的检测系统将所测核酸在其原有位置显示出来。
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质量保证: 筛选出的细胞单克隆的外源基因的表达水平与含有空载质粒的细胞单克隆相比具有统计学意义上的显著差异。
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凝胶迁移或电泳迁移率实验是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析,这以技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的互作用
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miRNAs分子具有卓越的品质:耐酸、耐碱,耐受反复冻融。莱德尔的技术人员通过反复摸索,解决了无细胞体液中检测miRNAs的关键技术,并具有极高的灵敏度。检测范围:血液、尿液、羊水、胸腔积液。
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blot主要用于组织细胞靶基因表达水平的研究以及对同一组织细胞的不同基因间的表达水平Northern进行比较,或者对不同组织细胞间相同基因的表达水平进行比较。
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采用瞬时转染的方法能够方便快捷地对miRNAs功能进行研究与分析,而且由于小分子的转染效率较高,对于gain-of-function的研究十分有效,对于较长时间才能出现的表型则需要反复转染miRNAs
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