一、 实验目的和原理

测定戊巴比妥钠（ 57-33-0） 腹腔注射对小鼠催眠作用的 ED50值。 戊巴比妥钠为巴比妥类镇静催眠药，
用适当剂量给小鼠腹腔注射后产生的催眠效应， 常用翻正反射的消失来判断， 该指标仅有阳性（ 睡眠） 和
阴性（ 不睡眠） 两种现象， 属于质反应。 质反应量效曲线的横坐标为对数剂量， 而纵坐标采用阳性反应发
生的频数时， 一般为常态分布曲线。 如改用累加阳性频数为纵坐标时， 可以得到标准的 S 型曲线。 该曲线
的中央部分（ 50%反应处） 接近一条直线， 斜度最大， 其相应的剂量也就是能使群体中半数个体出现某一效
应的剂量， 通常称为半数效应量。 如效应为疗效， 则称半数有效量（ ED50） ； 如效应为死亡， 则称半数致死
量（ LD50） 。 这些数值是评价药物作用强度和药物安全性的重要参数。 021-51602548
孙氏改进的 Kaerber 法的设计条件是： 各组实验动物数相等， 各组剂量呈等比数列， 各组动物的反应率大
致符合常态分布。 若以 Xm 为最大反应率组剂量的对数， i 为组间剂量比的对数， p 为各组反应率， Pm 为最
高反应率， Pn 为最低反应率， n 为实验组数， 则：
ED50＝ lg-1[Xm－ i（ ∑ P－ 0.5） ＋ i/4（ 1－ Pm－ Pn） ]
含 0%及 100%反应率时，
ED50＝ lg-1[Xm－ i（ ∑ P－ 0.5） ]
ED50的 95％ 可信限＝ lg-1（ lgED50± 1.96· S）
其中 S＝ i

二、 实验材料
小鼠 50 只， 1% 戊巴比妥钠（ sodium pentobarbital solution） 小鼠笼， 天平， 0.5ml 或 0.25ml 注射器。

三、 实验步骤
1、确定给药剂量：先以少量动物做预实验，以获得小鼠对戊巴比妥钠催眠反应率为 100％ 的最小剂量（ ED100）
和反应率为 0％ 的最大剂量（ ED0） 。 然后在此剂量范围内， 按等比数列分成几个剂量组（ 一般 4～ 8 组） ，
各组剂量的公比（ r） 为 r＝ n-1√ ED100/ED0
求得 r 后， 自第一剂量组（ ED0） 开始乘以 r， 可得相邻的下一个组的剂量。 若共分为 5 个组， 各组剂量分
别为 ED0、 r· ED0、 r2· ED0、 r3· ED0、 r4· ED0、 r5· ED0。
2、 给药： 取体重 25g 左右的健康小鼠 50 只， 查随机数字表， 随机分为 5 个组， 每组 8 只(除去极端重量小
鼠 2 只)。 按表 1 所列的各组给药浓度分别腹腔注射 0.1ml/10g。
3、 记录结果： 以翻正反射消失为入睡指标， 观察药物的催眠效应， 记录各组腹腔注射后 15min 内睡眠鼠数，
填入表 1。

四、 实验结果
表 1 计算戊巴比妥钠 ED50用表

根据表 1 的数据和上述公式可求得 ED50=31.90

注意事项
1、 为减少误差， 由 1 人配药
2、 保持环境安静
3、 如果第一组出现阳性动物， 则向下按公比增加一个低剂量组(d0=d1/r)
4、 最后一组动物未全部阳性， 向上增加一个剂量(dk+1=dkr)

实验动物的麻醉方法，除了使用戊巴比妥钠进行注射麻醉，还可以选择使用异氟烷气体麻醉：
小动物气体麻醉机

来自：玉研仪器公司

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