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新品 | 翌圣GMP级别RNA合成酶原料:BsaI

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2023-08-25T00:00 (访问量:10799)

新品 | 翌圣GMP级别RNA合成酶原料:BsaI


mRNA合成的关键步骤之一是将质粒DNA进行线性化,这一步需要使用限制性内切酶,IIs型内切酶是质粒线性化的首选内切酶,因为它们在识别位点下游切割DNA,可确保所设计的poly(A)尾的完整性,线性化后的DNA模板上不会留下“疤痕”,IVT过程中也不会添加不需要的核苷酸。BsaI是常见的IIs型内切酶之一,在mRNA合作中起着重要作用。

 

图1. BsaI识别位点及切割序列


 


 


翌圣GMP级别BsaI


翌圣的BsaI由大肠杆菌重组表达,GMP标准生产,酶切效率高、星号活性低、末端完整性良好,可用于mRNA疫苗生产的质粒线性化、慢病毒/腺病毒包装的载体构建、质粒制备的酶切验证、Golden Gate组装等。

 

 


产品特点


 1、完成FDA DMF备案(备案号:MF038306)

 

2、GMP级别,无动物源成分,严格质控

  • 严格按照GMP标准生产,确保无动物源成分引入。核酸酶,蛋白酶、宿主DNA/蛋白残留、支原体、内毒素等均严格质控确保产品质量。

3、高酶切效率,低星号活性,末端完整性良好

  • 具有高酶切效率,37℃反应16 h无星号活性,经酶切—连接—再酶切测试末端完整性良好。

 

4、性能优越,应用端性能媲美竞品

 

 



部分数据展示


01

无非特异性核酸酶残留

 

 将20 U BsaI与底物DNA在37℃孵育 1 h和16 h,琼脂糖凝胶电泳比较DNA谱带变化。结果显示翌圣BsaI无非特异性核酸酶残留。

 

图2. 非特异性核酸酶残留检测结果

 

02

末端完整性良好,与进口品牌效果一致

 

通过“酶切—连接—再酶切”的功能实验验证BsaI酶切的末端完整性,结果显示翌圣的BsaI末端完整性良好,与进口品牌效果一致。

图3. BsaI末端完整性检测结果

 

03

末端完整性良好,与进口品牌效果一致

 

在37℃下,将BsaI及底物DNA在酶切反应体系中共同孵育16h,未检测到星号活性引起的底物非特异性降解,表明翌圣BsaI 16 h孵育无星号活性。

图4. BsaI星号活性检测结果

 

 



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