L-精氨酸诱导胰腺炎模型(Acute pancreatitis, AP)
急性胰腺炎(Acute pancreatitis, AP)是临床上常见的急腹症,病因复杂,病死率达5%~10%,
重症AP死亡率高达20%~30%,目前发病机制尚未阐述,无特殊治疗方式。目前活体AP动物
模型制作常用方法大致有胰管结扎法、十二指肠闭袢法、胰胆管穿刺注射法、胰腺被膜下注射法、
胰胆管注射法结合静脉输注法、蛙皮素联用脂多糖腹腔内注射法等。
生理条件下,胰腺大量摄取氨基酸以合成胰酶,但高浓度氨基酸聚集会破坏胰腺外分泌腺,
诱发AP。L-Arg(L-精氨酸)是应用较为广泛的用于诱导AP动物模型的碱性氨基酸。
图1 L-精氨酸分子结构(CAS NO.74-79-3)
牛黄胆酸钠诱导胰腺炎建模步骤(仅供参考)
动物:
L-精氨酸可以诱导大多数动物发生AP,但是此类模型主要应用于啮齿类动物(如大鼠和小鼠)。
溶液配置:
用0.85%盐水制备L-精氨酸溶液,并过滤以使其无菌。
造模方法:
L-Arg诱导AP动物模型,通常剂量为250-500mg/100g。L-Arg的作用呈剂量和时间依赖性,单次注射L-Arg 500mg/100g,
70-80%胰腺腺泡细胞在3d内坏死,3次注射L-Arg 250mg/100g超过10d,近90%的腺泡被破坏。
1、大鼠:腹腔内给药1g/kg,1次;
2、小鼠:腹腔注射3×3或4×2.5 g/kg,10%,每次间隔1h。
模型判定指标:
注射后3、6、12h检测血清淀粉酶水平、胰腺组织的湿/干质量比率及病理组织学评分,观察24h生存指数
表1 胰腺的组织学评估
水肿 |
0 |
无水肿 |
1 |
小叶间水肿 |
|
2 |
小叶间和中度小叶内水肿 |
|
3 |
小叶间水肿和严重的小叶内水肿 |
|
白细胞浸润 |
0 |
无 |
1 |
稀少的血管周围浸润 |
|
2 |
中度血管周围和稀少的弥漫性浸润 |
|
3 |
大量弥漫性浸润 |
|
坏死 |
0 |
无坏死 |
1 |
少于15%的胰腺细胞 |
|
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