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说到阳离子脂质体你需要知道DOTAP和DOPE

作者:艾伟拓(上海)医药科技有限公司 2020-06-07T22:51 (访问量:16258)

本期AVT小编围绕阳离子脂质体,给大家讲讲阳离子脂质材料和DOTAP合成磷脂DOPE的重要性!
DOTAP,中文通用名称(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺,提起DOTAP,大家更多想到的是包载DNA、RNA等核酸类物质,然而,阳离子脂质体是基因治疗中研究最多的一种载体,而DOTAP则是阳离子脂质体中研究中使用最多的阳离子脂质。作为非病毒载体,DOTAP与病毒载体相比具有颇多优势,艾伟拓小编必须给大家介绍一下!
DOTAP,如小编上面介绍的,中文通用名称(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺,中文化学名称:(2,3-二油酰基-丙基)-三甲基铵-氯盐,132172-61-3是它的CAS号,作为试剂级别的合成磷脂,分子式为C42H80NO4Cl,分子量在698.56。外观性状为白色蜡状固体的它,需要-20±5℃,遮光密闭哦!
作为非病毒载体,其与病毒载体相比有哪些优势呢?
•保护治疗基因在体内循环中不被降解。通过对脂质体的表面基团进行特殊修饰后的阳离子脂质体能很好地包封DN**段,促进复合物与细胞膜的融合,增加DNA的摄取和表达;
•高效穿过细胞膜和核膜,转染细胞,使其表达/沉默基因;
•如果适应症为癌症,则能够选择性的吸附于带负电荷的新生肿瘤血管内皮细胞上,抗癌效果更好。
在阳离子脂质体的研究中使用最多的阳离子脂质就是DOTAP了。它是两亲分子,主要由三部分组成:极性头部(亲水基团)、连接键、疏水尾部。
通过静电作用与带有负电荷的DNA分子相结合的是DOTAP的极性头部,通常由叔胺或季铵盐构成,后来又研究出咪唑头部、氨基酸头部等。其极性头部对核酸分子的包载效率以及细胞毒性均有重要的影响。处方中DOTAP用量越大载药量越大,但zeta电位过高细胞毒性也越大,制剂安全性受影响,两者需平衡。
目前DOTAP较为成功的应用案例有紫杉醇阳离子脂质体EndoTAG-1以及喜树碱药物的阳离子脂质体EndoTAG-2,其作为优秀的转染试剂应用也很广泛。
说到合成磷脂DOPE,小伙伴们应该并不陌生,阳离子脂质体中合成磷脂DOPE如何发挥功效呢?
阳离子脂质体可与大分子DNA形成复合物,极大压缩DNA分子体积,从而有效进入细胞进行转染,又能避免病毒载体可能带给病人的免疫毒性,因此是安全有效的基因治疗载体。
DOTAP(溴化三甲基-2, 3-二油酰氧基丙基铵)、DOTMA(氯化三甲基-2, 3-二油烯氧基丙基铵)、DC-Chol(3β-[N-(N’,N’-二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇)是较为常用的阳离子脂质,但单独形成脂质体稳定性、膜融合性、转染效率差,所以常需要添加辅助脂质。其中DOPE(二油酰磷脂酰乙醇胺)是最为常用的辅助脂质,比使用DOPC(二油酰磷脂酰胆碱)、CHO(胆固醇)脂质体的融合性、转染效率均高。
在已经商品化的阳离子脂质体中,大部分都使用了DOPE为辅助脂质。
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