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菌种保存管常见问题解答之复苏菌种

作者:友康恒业生物科技(北京)有限公司 2017-08-29T08:53 (访问量:4256)

菌种保存管可保存一般细菌、苛刻菌,霉菌、酵母菌等真菌也可在低温条件下通过菌种保存管保存,因此菌种保存管被广泛应用于临床领域(临床药敏试验菌株的保存)、疾控领域(监测分离到的菌株的保存)、菌种保存中心(菌株的日常取用与保存)以及制药企业(阳性对照菌株保存和取用)等领域。

友康菌种保存管(货号:MS0101)采用瓷珠低温冷冻保存法。管内有25颗表面凹孔小瓷珠用于细菌的吸附和保存,可在保存周期内使用25次(每次1个)。

低温环境为优良菌株提供一个适合长期休眠的状态,即干燥、低温、缺乏氧气和养料等,使微生物处于最低代谢活动状态,但又不至于死亡,从而达到保藏的目的;小瓷珠经特殊处理,外部密布凹进的洞,菌株可牢固的吸附其上;保存液含有特殊低温保护剂,可减少冻存过程中冰晶对菌种的影响。


菌种保存管常见问题解答之复苏菌种

1、为什么在复苏菌株时,操作过程要求快速?
答:之所以要求快速复苏,是因为在菌种复苏的过程中,长时间的溶解过程会对所保存的菌种造成损伤,而YOCON经过改良的保存方法最大程度的避免复苏所造成的影响,但我们还是建议遵循菌种的保存复苏原则,保证所复苏菌种的复苏率。

2、将菌株反复冻融,到底对菌株有什么影响?
答:低温会使菌株细胞内的水分形成冰晶,从而引起细胞结构尤其是细胞膜的损伤。细胞体积大者一般要比较小者对低温更为敏感,而无细胞壁者则比有细胞壁者敏感。如果放到低温(不是一般冰箱)进行冷冻时,会产生冰晶,冰晶呈针状,极易导致细菌的严重损伤。用电镜观察,可见细菌的核膜上有大量针尖样小孔,当从低温下移出并开始升温时,冰晶又会变大,故反复冻融,会对菌株造成极大损伤。
而瓷珠菌种保存管主要靠瓷珠保存菌种,复苏时,只需将小瓷珠摇散,用接种针挑取瓷珠直接划平板即可。


菌种保存管常见问题解答之其他问题

1、为什么有时候菌种的保存效果不佳?
答:可能是由于保存后未将保存液吸尽,反复冻融形成冰晶损伤菌株细胞,影响了菌株活性;
确定所保存的菌种是否为对数生长期的菌种,我们建议普通菌种保存为18小时内的新鲜菌种,而霉菌和酵母菌需要保存其对数生长期阶段的菌种。

 2、为什么我保存在平板上的菌每隔一段时间就得重新传一次,即使是放在温度为2-8度的冰箱中?
答:在2-8℃保存的菌种,并不是出于低代谢率的环境,所以此环境下保存的菌种极易变异,故一般一个月重新传代一次,确定菌种有无变异,并且连续传5代后的菌种不能使用。


菌种复苏步骤:

1.取出菌种保存管并用力摇晃,使管内瓷珠分散。无菌条件下拧开菌种保存管,用无菌的接种环(接种针)或镊子取出1粒小瓷珠,拧紧瓶盖。
2.尽可能快地将菌种保存管放回原来的保存环境,温度过多改变将减弱菌株的生存能力。
3.取出的小瓷珠可以直接放在平板培养基上作划线接种,或者直接置于适合的液体培养基中培养。

菌种复苏步骤.jpg 菌种复苏步骤.jpg
从冰箱或液氮中取出菌种保存管 用无菌镊子或接种针夹住小瓷珠,
直接在相应平板上划线接种或将
瓷珠直接放入相应液体增菌液中。

 

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