Fluorotechnics蛋白荧光探针技术

  • 来源:生物谷
  • 时间: 2008/2/16
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    Fluorotechnics蛋白荧光探针技术
     ——蛋白组学研究的最新型工具
     
        Fluorotechnics公司是基于蛋白组学的研究热点以及澳大利亚强大的蛋白组学研究平台而发展起来的。其技术来源于Macquarie大学蛋白研究组,拥有荧光探针Epicocconone技术专利,目前主要研发高灵敏、高兼容性、高生物安全的蛋白荧光探针和检测试剂盒。GE HealthcareSIGMA ALDRICHActive Motif公司相继成为Fluorotechnics产品的国际代理商,使得其产品在蛋白研究领域的应用日益广泛,成为蛋白组学研究的有力工具。
    I. 新型蛋白荧光探针——Epicocconone 
        Fluorotechnics公司的荧光检测产品基于新型的蛋白荧光染料Epicocconone,具有其他同类产品不可比拟的优势:

      1.Epicocconone提取自真菌Epicoccum  nigrum,天然、可生物降解的荧光材料。是一种

      2.Epicocconone是一类分子小(410Da)、水溶性的荧光材料。它在自然状态下发出微弱的绿色荧光;与蛋白或多肽形成复合物后发出强烈的红色荧光(如图)。
     
      3. Epicocconone与蛋白结合过程可逆,并且是pH依赖的,实验者可以控制条件来控制该染料对蛋白的结合以及洗脱,对样品没有任何损伤。
     
      4.Epicocconone与蛋白、多肽的复合物可以利用大多常见光源(405 nm,488 nm,532 nm,UVA等)来激发;在610nm处具有最大的发射光。
      II.Fluorotechnics公司蛋白荧光检测产品:
                                                                     
    (1)  总蛋白凝胶染色、Blot膜染试剂盒:LavaPurple™ Total Protein Stain for Gel and Blot &Buffer Pack
     
      LavaPurple™试剂盒利用荧光探针Epicocconone的技术优势,特别适用于蛋白组、多肽组学研究领域一维、二维、IEF电泳凝胶染色,也适用于Blot转膜后的膜染色。

    LavaPurple1079 spots            Sypro Ruby(877 spots)

    分别用LavaPurpleSYPRO Ruby荧光标记检测大鼠微粒体蛋白双向凝胶电泳结果比较。文献:The spot number in each gel was calculated by the Malanie 3 software (Gene Bio). (Taken from Mackintosh et al., 2003, Proteomics 3, 2273 – 2288.)

    A) 产品特点: 

    • 高灵敏度:目前最灵敏的蛋白荧光标记(染胶可检测到低至50pg的标准蛋白)
    •  检测范围大:可达4个数量级。
    •  适用范围广,背景影响小: 特别适用于单向和双向电泳染色,以及印迹PVDF、硝酸纤维素膜染色;对比其他染料,更少的假阳性蛋白点。
    • 样品回收率高:染色和洗脱过程对样品无损伤,回收样品可用于后续实验,如MS、免疫染色或Edman测序
    • 操作十分简便
    • 与荧光差异双向电泳DIGE、考染或银染等兼容
    • 使用安全:不含重金属等有害物质,可生物降解,对环境无污染。
    B) LavaPurple™产品规格:
         LavaPurple™产品为200×(凝胶染色)浓缩液,有两类包装,一类试剂盒包装,包含荧光染色过程所需的全部试剂;另一类为荧光探针试剂和缓冲液分开包装,便于客户选择。
     

    产品名称
    编号
    规格
    LavaPurple™ -Total Protein Kit
    (包含检测所需的全部试剂:染液和辅助缓冲液)
    LP-011005
    5ml
    LP-011025
    25ml
    LP-011100
    100ml
     
    LavaPurple™ -Total Protein Stain
    (不含辅助试剂)
    LP-012005
    5ml
    LP-012025
    25ml
    LP-012100
    100ml
     
    LavaPurple™ -Buffer Pack
    (辅助试剂包)
    BP-011005
    5ml pack
    BP-011025
    25ml pack
    BP-011100
    100ml pack

    (2)多肽定量检测试剂盒:LavaPep™ Peptide Quantification kittide

                           应用LavaPeptide™检测标准蛋白BSA所得到的标准曲线图例
    A)产品特点:
    • 灵敏度高:可以精确定量低至100 ng/mL的蛋白量。
    • 定量范围高达3个数量级(160ug/mL-100ng/mL), 检测样品体积灵活(100 µL - 3 mL )
    • 可检测几乎所有蛋白(包括糖蛋白),样品无需加热或还原处理。
    • 操作方便快捷,60min即可读数;荧光信号不受光和温度的影响,6个小时内保持稳定。
    • 对样品无损伤,可用于后续检测(MS、HPLC、PMF、Edman测序等)
    • 无背景影响,不受DNA、去污剂、DTT和Urea等因素干扰。
    • 安全,对环境无污染。 

    B)产品规格

    产品名称
    编号
    规格
     LavaPeptide™-Peptide Quantification Kit 
    LP-022010
    2000 samples

    (3)蛋白水解检测试剂盒LavaDigest Protease Monitoring Kit
     
       蛋白水解检测是食品工业、蛋白组学和酶工程研究中极其重要的检测项目.例如在质谱分析前蛋白消化分析, 重组蛋白tags的移除检测等;传统的检测方法往往过程复杂、耗时大以及结果不易判断。LavaDigest Protease Monitoring Kit是Fluorotechnics公司最新产品,它利用荧光探针能方便、快捷地对蛋白水解实时检测。
     
    A) 产品特点:
    •  操作简单,可进行实时监测。
    •  特别适合于蛋白组学分析,如MS前的蛋白消化检测。
    • 对蛋白或多肽样品无损伤,处理样品可用于后续实验,如MS、HPLC、 Immunostaining等。
    • 对蛋白酶活性没有影响。
    • 无污染,对环境安全。 

    B) LavaDigest™产品规格:

    产品名称
    编号
    规格
    LavaDigest™ -Tryptic Digest Monitoring Kit 
    LP-031020 
    2000 samples

    (4) 细胞荧光成像试剂盒:LavaCell Live Imaging Stain
     
       Epicocconone为一类水溶性的小分子中性荧光探针(410Da),所以Epicocconone很容易穿透胞膜结构进入细胞;另外,此探针对细胞生长率和其他功能没有任何不利影响;另外,此探针只有与蛋白结合后才发出红色荧光,所以无需洗涤未结合的染料。
       Epicocconone成为活细胞和固定细胞荧光成像的最理想选择。也特别适合与其他荧光染料联合使用,对细胞进行多色荧光标记。

    LavaCell应用于活细胞(左)和固定细胞(右)成像

                               LavaCell™与SYTOX green(细胞核)联用于固定细胞多色荧光成像
     
            LavaCell™产品规格:

    产品名称
    编号
    规格
    LavaCell™ -Live Cell Imaging Stain
    LC-011001
    200uL
    LC-011002
    1mL