尚柏生物强势独家推出双荧光素酶报告基因检测技术服务

  • 来源:生物谷
  • 时间: 2010/5/7
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    细胞信号转导研究的利器——双荧光素酶报告基因检测

    信号转导检测
    细胞信号转导的调节(抑制或增强)
    目的蛋白对已知蛋白的调控
    启动子/增强子检测
    病毒/细胞相互作用
    转录因子(IFN  -NF-KB,IRF3)
    药物诱导作用或效果
    各种射线处理对细胞因子的调控研究


    传统检测方法——WB
    SCI文章必备数据(IF>3,调节功能研究)。
    Western blotting 得到结果所需时间太久.
    操作过程繁琐,并且需要使用比较昂贵的抗体.
    WB结果缺乏统计学依据。
    人为影响因素太大

    荧光素酶报告基因的优点
    优越的灵敏度,比Westernbloting灵敏度高1000倍以上。
    具有可靠的统计学原理,每组实验重复三次。
    高信号值,无内源活性。
    目前主流检测方法。
    检测快,灵敏度高。
    我们并不放弃WB检测,在荧光素酶检测后,样品在进行WB检测,使实验更具有说服力。
    使用范围广,可检测细胞内任何分子。

    荧光素酶报告基因的检测原理
    原理:制备含有Luc/Rluc的DNA载体,进行过表达细胞株。

    细胞选择:根据实验需要选择细胞株,通常选择转染效率较高的293T,Hela细胞及原代细胞等。

    转染:将带有荧光素酶标记的报告基因和目的基因进行过表达 (不同时间点) .

    提供刺激:一般为药物处理,病毒感染,紫外照射等各种条件刺激。

    蛋白收集:采用进口/国产试剂盒(Promega,invitrigen,尚柏生物)进行收集,实验重复三次。

    测量荧光:Modulus™ 单管型多功能荧光计 进行检测。

    结果分析


    服务内容
    1.我们提供IFN-Luc,IFN-Luc,ISRE-Luc,PRDII-Luc,ERSE-Luc,UPRE-Luc,NF-KB-Luc双荧光素标记的报告基因,可对IFN-α, IFN- β, IRF3, NF-KB等通路检测。
    2.我们提供常见表达细胞:293T,Hela及常见的原代细胞等。
    3.客户只需根据实验需要提供目的基因、荧光素标记的报告基因、表达细胞即可。
    4.我们提供真实的原始数据,结果分析报告。