总有一款适合您的基础培养基~

来源: 上海逍鹏生物科技有限公司   2020-11-24   访问量:897评论(0)

 

培 养 基

 

培养基是用来供给细胞营养,促使细胞增殖,也是细胞赖以生长的环境。

细胞培养实验中用量最多的就是细胞培养基,虽然细胞培养实验基本技术大同小异,但是每种细胞的培养条件却相差甚远。若偏离某种细胞所需的培养条件,则会导致细胞表达不同的表型。

培养基按照来源分类:在动物细胞体外培养实验中,可使用天然培养基(Natural Medium)或是合成培养基(Synthetic/Artificial Medium)。


 

天然培养基

源于动物体液或组织分离提取,营养成分丰富且各项条件与体内环境相似,所以培养效果佳,但是由于来源于动物,成分复杂,且批间差较大。


 

合成培养基

是由高纯度化学成分(无机盐、氨基酸、维生素、含碳物质等)与纯水配制而成,所有成分都是确定且可知其确切含量的。合成培养基根据实验目的又可分为三种:

  • 短时间保存细胞活性

    即各类平衡盐溶液,具有特定的pH和渗透压;能维持细胞离开生物体后几小时内的活性。

  • 延长细胞存活时间

    基础培养基,在平衡盐溶液中添加各种有机化合物或血清,配合适当的实验操作条件,可将细胞培养至多代。

  • 特殊功能

    特殊培养基,根据实验目的-诱导分化、增殖等要求,将基础培养基额外添加各类因子的特殊培养基。

目前,合成培养基凭借成分明确且种类繁多等特点和优势占据市场主导地位,也是研究人员的首要选择。

 

 

合成培养基成分与功能

培养基一般含有氨基酸、无机盐、维生素、含碳物质和其他营养元素,每种成分对于细胞存活、代谢等功能都有不同影响,不同细胞系需要的成分含量也不同,因此市面上会存在各类培养基配方。

因培养基种类繁多,因而,我们只简单列举了几种常见基础培养基为大家进行介绍。

 

 

 

01 DMEM

Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)是目前最常使用的改良式Eagle's培养基。DMEM与MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。主要用于快速生长的细胞,分低糖(1000 mg/L)、高糖(4500 mg/L)两种。DMEM含更高浓度的NaHCO3,要用10%的CO₂来平衡,当然也可以在较低CO₂浓度下使用。

DMEM-高糖(标准型)更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。

DMEM-低糖(标准型)适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。

 

02 RPMI-1640

RPMI-1640营养成分比较简单,比DMEM少一点糖和谷光甘肽,广泛应用于许多种正常细胞和肿瘤细胞、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

 

03 DMEM/F12

F12培养基成分丰富,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基,作为无血清培养基的基础,利用了F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。

该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,可以在DMEM/F12(1:1)中加入15 mM HEPES缓冲液。

 

04 McCoy's 5A

McCoy's 5A Medium最早是用于肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代细胞的生长。除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。

05 M-199

M-199培养基由Morgan等人研制,是第一个具有确定化学成分的细胞培养液,原本是用来研究鸡胚原代细胞。除BSS(平衡盐溶液)外,含有53种成分,为全面培养基,此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。主要用于鸡胚成纤维细胞培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞,并能培养转染的细胞,广泛用于病毒学、疫苗生产。

 

06 MEM

Minimal Essential Medium是最基本的培养基, 设计之初是为了培养HeLa细胞以及部分哺乳类的成纤维细胞。MEM含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,适合多种细胞单层生长。以MEM为基础,Stanner利用Earle's Balanced Salts和非必需胺基酸(NEAA)进一步配制成MEM-Alpha培养基,可广泛用于哺乳动物细胞的培养。

逍鹏生物查阅了相关网站,为您整理了相关细胞所对应的BI培养基,供您参考。

好啦,本期介绍就到这里了
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