血液肿瘤常用体内外模型总结&工具病毒使用指南

来源: 上海吉凯基因化学技术有限公司   2016-12-29   访问量:32512评论(0)

血液肿瘤主要包括各类白血病、多发性骨髓瘤以及恶性淋巴瘤。急性白血病占常见恶性肿瘤的第八位,淋巴瘤也是在前十位,并且发病率逐年升高,多发性骨髓瘤的整个发病率在血液恶性肿瘤里面占10%。

血液肿瘤发病急,在传统的放疗、化疗、骨髓移植等治疗方式下,治疗周期长、费用高昂、过程痛苦,但治愈率却并不很理想。儿童白血病是儿童发病率最高的一种恶性肿瘤,近几年临床病例数量更是在逐年上升,已成为儿童肿瘤中的头号杀手。因此,血液肿瘤的治疗研究是当务之急。针对血液肿瘤的研究少不了细胞和动物模型的加持。怎么选择这些工具能够帮助我们更好的进行研究,获得阳性数据,发表论文,申请基金,登上人生巅峰,你有了解吗?


一、我需要哪种细胞模型?是否易于操作?

研究过程中,为了验证基因的功能,我们常常需要做基因操作(过表达,干扰或者敲除)。但由于血液肿瘤细胞悬浮生长的特性,大大增加了基因操作的难度。慢病毒是一种非常高效的基因操作工具,在大部分悬浮细胞系中也具有不错的表现。下面帮大家总结了一些常用血液肿瘤细胞的特性,以及慢病毒的应用情况:

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悬 浮 细 胞 感 染 小 贴 士↓↓↓



如果细胞MOI>>100,怎么办?吉凯对于难感染的悬浮细胞,也有办法:

1. 初级版:采用离心感染方法,增加病毒感染时与细胞的接触,从而提高感染效率。如将细胞培养板密封后,用平角转子离心机1000g离心15min-1h,再放回培养箱中正常培养;

2. 进阶版:使用GMP级慢病毒。尤其对于一些原代分离的细胞,可通过使用高纯度的病毒减小病毒感染对细胞的影响,从而提高感染效率。吉凯拥有国内唯一基因工程载体GMP生产车间,特殊纯化工艺保证临床级慢病毒的纯度和滴度;

3. 终极版:如果是做CAR-T的老师,还可配合使用吉凯自有专利的CAR-T细胞感染试剂盒,可保证T细胞病毒感染效率在40%-80%。

二、细胞实验效果不错,那动物实验怎么做?

稳定性、重复性较好的动物模型可在肿瘤基础性研究和抗肿瘤药物筛选中发挥重要作用。血液肿瘤常用的动物模型主要有:I皮下移植瘤模型;II血液模型。皮下移植瘤模型较容易建立,易于动态观察肿瘤的生长状态。血液模型则一般以生存天数作为观察终点,用活体成像、病理切片、流式细胞术等方法检测小鼠骨髓及脏器中的肿瘤细胞生长及浸润情况。该模型与白血病患者的病理生理状况较为接近,但实验难度较大。


体内外模型选好了,那么我的实验需要使用哪种慢病毒载体对基因进行操作呢?

启动子、荧光标记、抗性标签是我们选择载体需要考虑的三大要素。实验不同,这些元件也需要相应变化。按例祭出神图一张,定制你的专属载体,就是这么简单!

上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年,拥有BSL-2级别的慢病毒包装实验室。病毒生产线通过ISO9001质量管理体系验证,月均定制基因病毒产品包装超过1000次。慢病毒生产采用6项QC检测、病毒纯度分级纯化以及病毒滴度绝对定量检测确保病毒质量。

400名兢兢业业的吉凯人,用专业换您的高效。

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参考文献

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之前几期给大家分享了几种大癌种的体内外模型和工具总结,想再看看的,请戳下面:

1. 肺癌研究体内外模型综述

2. 结直肠癌研究体内外模型综述

3. 胃癌研究体内外模型综述

4. 肝癌体内外模型综述

5. 胰腺癌研究体内外模型综述


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